PRÁCTICA DE RETICULOCITOS

 

PRÁCTICA Nº9                                                                                      1-12-2020

TÍTULO: tinción vital y contaje de reticulocitos

FUNDAMENTO: podemos observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción de azul de metileno nuevo o azul de cresil brillante. En este caso la tinción es de células vivas, TINCIÓN VITAL. Por ello 1º se va a teñir la sangre y después se va a hacer la extensión. Al extenderlas se produce la desecación de las células como único medio de fijación, para que no mueran; es decir no se va a utilizar fijador (metanol). Lo que se va a estudiar es el grado de maduración del reticulocito: desde grado I a IV. Cuantos más retículos o restos de RNA menos maduros. También se va a contar el Nº de reticulocitos con respecto a hematíes.

En la actualidad esto se demanda mucho siempre que se vea una anomalía, no es un valor que se pida en el hemograma normal.

MATERIALES: microscopio, tubo de hemolisis, pipeta pasteur, baño maría, sistema de filtración

REACTIVOS: azul de cresil en polvo, SS 0,9%, citrato sódico al 3%, agua destilada, sangre y aceite de inmersión

TÉCNICA:

1.    Preparar el colorante: 80ml de SS y 20ml de citrato sódico, luego 1g de azul cresil brillante y se disuelve (filtrar antes)

2.    Tinción de reticulocitos: 4 gotas del colorante y 4 gotas de sangre

3.    Mezclar y tapar con Parafilm, introducir al baño maría a 37º unos 5 min o incubar

4.    Volver a homogeneizar y realizar la extensión

5.    Verla al microscopio para realizar el contaje

RESULTADOS: los hematíes de color verde intenso y los reticulocitos con hilos de color azul, se deberían contar unos 2000 hematíes

CALCULOS:

HTO	DIAS
45%	1
35%	1,5
25%	2
15%	2,5